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几丁质酶基因表达载体pET-chiB的构建及其在大肠杆菌中的诱导表达

时间:2023-04-27 04:30:39 生物医学论文 我要投稿
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几丁质酶基因表达载体pET-chiB的构建及其在大肠杆菌中的诱导表达

几丁质酶在降解几丁质的过程中起着重要作用,目前人们已从不同微生物体中分离并克隆出了多种几丁质酶基因.实验以pET-22b(+)为载体,利用从粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)克隆出的chiB基因,构建出原核生物表达载体pET-chiB.通过表达载体pET-chiB的诱导表达.实验结果显示该基因表达的蛋白为可溶性蛋白,其分子量约为52 kD.利用不同参数包括时间、IPTG浓度和温度诱导表达载体pET-chiB表达并对表达产物进行SDS-PAGE分析,结果显示其诱导表达的最佳参数分别为4 h,0.5 mmol/L和25℃.这些结果为几丁质酶基因的进一步研究和几丁质酶工程菌生产奠定了良好的工作基础.

作 者: 叶辉 冯春 程郢 朱苏文 程备久 YE Hui FENG Chun CHENG Ying ZHU Su-wen CHENG Bei-jiu   作者单位: 叶辉,YE Hui(安徽农业大学生物技术中心,安徽,合肥,230036;安徽农业大学生命科学学院,安徽,合肥,230036)

上海龙凤1314 shlf冯春,FENG Chun(安徽农业大学农业园及试验总场管理中心,安徽,合肥,230036)

上海龙凤1314 shlf程郢,朱苏文,程备久,CHENG Ying,ZHU Su-wen,CHENG Bei-jiu(安徽农业大学生命科学学院,安徽,合肥,230036) 

刊 名: 激光生物学报  ISTIC 英文刊名: ACTA LASER BIOLOGY SINICA  年,卷(期): 2008 17(3)  分类号: Q786  关键词: 几丁质酶基因   pET-chiB   构建   表达   IPTG诱导   chitinase gene   pET-chiB   construction   expression   IPTG inducing  

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