p53基因突变子175 H、248 W和273 H的定点突变及表达载体的构建

目的:定点诱变合成p53基因突变子进而构建表达载体.方法:以野生型p53基因为模板,采用PCR体外定点突变技术,设计2对引物,将突变位点设计在引物上,通过重叠延伸法2次PCR扩增,扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆入pcDNA3.1载体中.结果:在预期位点已经发生突变,p53基因第175位密码子由精氨酸(cgc)突变为组氨酸(cac),第248位密码子由精氨酸(cgg)突变为色氨酸(tgg),第273位密码子由精氨酸(cgt)突变为组氨酸(cat).p53基因突变子表达载体成功构建.结论:PCR技术诱导定点突变准确、高效.基因突变体的成功构建,为进一步研究该突变位点奠定了基础.

作 者： 刘扬 赵银龙 刘晓冬 马淑梅 龚守良 刘树铮 LIU Yang ZHAO Yin-long LIU Xiao-dong MA Shu-mei GONG Shou-liang LIU Shu-zheng   作者单位： 吉林大学公共卫生学院,卫生部放射生物学重点实验室,吉林,长春,130021  刊 名： 吉林大学学报（医学版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)  年，卷(期)： 2006 32(4)  分类号： Q3  关键词： 基因,p53   突变子   定点突变   遗传载体   聚合酶链反应/方法  

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