上海龙凤1314 shlfGST-GnRH/TRS融合蛋白(包涵体)的分离、纯化与复性研究

上海龙凤1314 shlf以人工合成的促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)/转运肽(TRS)基因与表达载体pGEX-6p-1相连的重组子(pGE-G)作为研究对象,转化大肠杆菌BL21(ED3)plyS.本文对GST-GnRH/TRS/ BL21(DE3) plyS工程菌的GST-GnRH/TRS重组产物进行了诱导表达和分离纯化的研究,结果表明,该工程菌用LB培养基在30℃扩增至OD590为0.6左右,加IPTG(终浓度为0.2 mmol/L)诱导3.5 h,此时GST-GnRH/TRS的表达量可占菌体总蛋白的33.3%.重组产物绝大多数以IBs形式存在于菌体中.工程菌经溶菌酶破碎、高速离心,得IBs粗制品后,再用8 mL 1%(V/V)Triton X-100变性溶解IBs,离心取上清,进行Glutathione Sepharose 4B柱一步法亲和层析,得到了纯度较高的GST-GnRH/TRS融合蛋白,为进一步研究和实际应用奠定基础.

作 者： 金元昌 陈春岚 苏晓艳 李会东 令玉林 李景鹏 JIN Yuan-chang CHEN Chun-lan SU Xiao-yan LI Hui-dong Ling Yu-Lin LI Jing-peng   作者单位： 金元昌,李会东,JIN Yuan-chang,LI Hui-dong(湖南科技大学生命科学学院,湖南湘潭,411201)

上海龙凤1314 shlf陈春岚,CHEN Chun-lan(贺州学院,广西贺州,542800)

苏晓艳,SU Xiao-yan(湖西科技大学附属医院,湖南湘潭,411201)

上海龙凤1314 shlf令玉林,Ling Yu-Lin(湖南科技大学化学化工学院,湖南湘潭,411201)

上海龙凤1314 shlf李景鹏,LI Jing-peng(东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨,150030) 

刊 名： 西北农业学报  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA  年，卷(期)： 2006 15(4)  分类号： Q785 S852.21  关键词： GnRH   融合蛋白   分离纯化与复性  

【GST-GnRH/TRS融合蛋白(包涵体)的分离、纯化与复性研究】相关文章：

重组包涵体的纯化与复性04-26

抗体分离纯化技术的研究进展04-27

木聚糖酶的分离纯化及性质研究04-26

GST-talin1融合蛋白的原核表达及纯化04-27

家蚕抗菌蛋白Cecropin D和Lysozyme的分离纯化及性质鉴定04-26

水稻可溶性糖蛋白的纯化与鉴定研究04-26

融合蛋白连接肽的研究进展04-27

大孔树脂分离纯化葛根总黄酮工艺研究04-27

粪肠球菌Ace重组蛋白的表达、纯化及黏附活性研究04-27

重组别藻蓝蛋白(rAPC)的纯化与鉴定04-26